РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ, ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ

(19) RU (11) 2 251 544 (13) C2 (51) МПК C07D 207/16 (2000.01) A61K 31/401 (2000.01) A61P 3/10 (2000.01)

(54) N-ЗАМЕЩЕННЫЕ 2-ЦИАНПИРРОЛИДИНЫ

Настоящее изобретение относится к новым ингибиторам дипептидилпептидазы IV (ДПП-IV), эффективным в отношении лечения состояний, опосредуемых ДПП-IV.

В последние годы было установлено, что ДПП-IV вызывает инактивацию глюкагонподобного пептида-1 (ГЛП-1). Поскольку ГЛП-1 является основным стимулятором секреции инсулина панкреатической железой и оказывает непосредственные благоприятные воздействия на выведение глюкозы, то ингибирование ГЛП-1, по-видимому, представляет собой перспективный подход к лечению таких состояний, как инсулиннезависимый сахарный диабет (NIDDM).

Известны N-(N’-замещенный глицил)-2-цианопирролидины, которые ингибируют ДПП-IV и используются для лечения состояний, опосредованных ДПП-IV (WO 98/19998).

Настоящее изобретение относится к новым N-(замещенный глицил)-2-цианпирролидинам формулы I

где R обозначает замещенный адамантил; и

n равно 0-3; в свободной форме или в форме кислотно-аддитивной соли.

Соединения формулы I могут существовать в свободной форме или в форме кислотно-аддитивной соли. Предпочтительными являются фармацевтически приемлемые (т.е. нетоксичные физиологически приемлемые) соли, хотя также могут применяться другие соли, например, при выделении или очистке соединений по настоящему изобретению. Хотя предпочтительными кислотно-аддитивными солями являются гидрохлориды, также могут применяться соли метансульфоновой, серной, фосфорной, лимонной, молочной и уксусной кислот.

Соединения по изобретению могут существовать в форме оптически активных изомеров или диастереоизомеров и могут быть разделены и выделены с помощью обычных методов, таких как хроматография.

Ниже перечислены определения различных понятий, используемых при описании настоящего изобретения. Эти определения применимы к понятиям, используемым в настоящем описании индивидуально или как часть более крупной группы, если в конкретном случае не указано иное.

Понятие "алкил" обозначает углеводородные группы с прямой или разветвленной цепью, имеющие 1-10 атомов углерода, предпочтительно 1-7 атомов углерода, наиболее предпочтительно 1-5 атомов углерода. Примеры алкильных групп включают метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил, изобутил, пентил, гексил и т.п.

Понятие "алканоил" обозначает алкил-С(О)-.

Понятие "замещенный адамантил" обозначает адамантил, т.е. 1- или 2-адамантил, имеющий один или несколько, например, два заместителя, выбранных из ряда, включающего алкил, -OR₁ или -NR₂R₃; где R₁, R₂ и R₃ независимо друг от друга обозначают водород, алкил, С₁-С₈алканоил, карбамил или -CO-NR₄R₅; где R₄ и R₅ независимо друг от друга обозначают алкил, незамещенный или замещенный арил и где один из радикалов R₄ и R₅ дополнительно обозначает водород, или R₄ и R₅ вместе обозначают С₂-С₇алкилен.

Понятие "арил" предпочтительно обозначает фенил. Замещенный фенил предпочтительно представляет собой фенил, замещенный одним или несколькими, например двумя, заместителями, выбранными, например, из ряда, включающего алкил, алкокси, галоген и трифторметил.

Понятие "алкокси" обозначает алкил-О-.

Понятие "галоген" или "гало" обозначает фтор, хлор, бром и йод.

Понятие "алкилен" обозначает мостик, представляющий собой прямую цепь, включающую 2-7 атомов углерода, предпочтительно 3-6 атомов углерода, наиболее предпочтительно 5 атомов углерода.

Предпочтительная группа соединений по изобретению состоит из соединений формулы I, где заместитель на адамантиле присоединен в положении перед мостиком или к метилену, смежному с положением перед мостиком. В соединениях формулы I, где глицил-2-цианпирролидиновый фрагмент присоединен в положении перед мостиком, заместитель R’ на адамантиле предпочтительно представляет собой 3-гидрокси. В соединениях формулы I, где глицил-2-цианпирролидиновый фрагмент присоединен к метилену, смежному с положением перед мостиком, заместитель R’ на адамантиле предпочтительно представляет собой 5-гидрокси.

Настоящее изобретение предпочтительно относится к соединению формул (IА) или (IВ)

где R’ обозначает гидрокси, C₁-С₇алкокси, C₁-C₈-алканоилокси или R₅R₄N-CO-O-, где R₄ и R₅ независимо друг от друга обозначают С₁-С₇алкил или фенил, который является незамещенным или замещен заместителем, выбранным из ряда, включающего С₁-С₇алкил, С₁-С₇алкокси, галоген и трифторметил и где R₄ дополнительно обозначает водород; или R₄ и R₅ вместе обозначают С₃-С₆алкилен; и R’’ обозначает водород; или R’ и R’’ независимо друг от друга обозначают С₁-С₇алкил; в свободной форме или в форме фармацевтически приемлемой кислотно-аддитивной соли.

Соединения по изобретению могут быть получены, например, способом, который предусматривает сочетание реакционноспособного (2-цианпирролидино)карбонилметиленового производного с соответствующим образом замещенным амином; более конкретно для получения соединений формулы I способ предусматривает взаимодействие соединения формулы II

где Y обозначает реакционноспособную группу (предпочтительно галоген, такой как бром, хлор или йод), с соединением формулы III

где R имеет указанные выше значения, и восстановление образовавшегося соединения формулы I в свободной форме или в форме кислотно-аддитивной соли.

Способ по изобретению может быть осуществлен обычным образом. Например, соединение формулы II подвергают взаимодействию с 1-3 эквивалентами, предпочтительно 3 эквивалентами первичного амина формулы III. Реакцию обычно проводят в присутствии инертного органического растворителя, такого как метиленхлорид, или простого циклического эфира, такого как тетрагидрофуран. Температура предпочтительно находится в диапазоне от приблизительно 0 до приблизительно 35°С, предпочтительно от приблизительно 0 до приблизительно 25°С.

Соединения по изобретению могут быть выделены из реакционной смеси и очищены общепринятым методом, например хроматографией.

Исходные продукты также могут быть получены обычным методом. Соединения формулы II могут быть получены согласно следующей реакционной схеме, включающей две стадии:

Стадия 1 включает взаимодействие пирролидина формулы IV с небольшим молярным избытком галоацетилгалогенида, такого как бромацетилбромид или хлорацетилхлорид, и основанием, таким как карбонат калия или триэтиламин. Реакцию обычно проводят в присутствии инертного органического растворителя, такого как тетрагидрофуран, или хлорированного алифатического углеводорода, такого как метиленхлорид, при температуре от приблизительно 0° до приблизительно 25°С, предпочтительно при температуре от приблизительно 0° до приблизительно 15°С.

Стадия 2 включает дегидратацию соединения формулы V, полученного на стадии 1, с помощью 1-2 эквивалентов ангидрида трифторуксусной кислоты (ТФУА). Дегидратацию предпочтительно осуществляют в присутствии инертного органического растворителя, такого как тетрагидрофуран, или хлорированного алифатического углеводорода, такого как метиленхлорид, при температуре от приблизительно 0 до приблизительно 25°С, предпочтительно при температуре от приблизительно 0 до приблизительно 15°С.

В том случае, когда в настоящем описании конкретно не изложен метод получения, соединение, используемое в качестве исходного продукта, является известным или может быть получено из известных соединений известным образом или аналогично известным методам, или аналогично методам, описанным в примере.

Например, производные первичного амина формулы III являются известными и могут быть получены методами, описанными в литературе, например в Khim.-Farm. Zh., 20(7), 810-815 (1986).

Наконец, соединения по изобретению получают либо в свободной форме, либо в форме соли, если присутствуют солеобразующие группы.

Соединения по изобретению, имеющие основные группы, могут быть превращены в кислотно-аддитивные соли, прежде всего в фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли. Они могут быть образованы, например, с неорганическими кислотами, такими как минеральные кислоты, например, с серной кислотой, фосфорной или галогенводородной кислотой, или с органическими карбоновыми кислотами. Предпочтительными являются соли соляной кислоты.

Принимая во внимание близость соединений в свободной форме и соединений в форме их солей, следует иметь ввиду, что, когда в настоящем описании упоминается соединение, то также подразумевается соответствующая соль, если ее образование возможно или целесообразно в конкретных условиях.

Соединения, включая их соли, также могут быть получены в форме их гидратов, или могут включать другие растворители, применяемые для их кристаллизации.

Под объем настоящего изобретения также подпадают фармацевтические композиции, например композиции, пригодные для ингибирования ДПП-IV, содержащие фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель и терапевтически эффективное количество соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой кислотно-аддитивной соли.

Еще в одном варианте осуществления изобретение относится к способу ингибирования ДПП-IV, предусматривающему введение млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения формулы I или его терапевтически приемлемой кислотно-аддитивной соли.

В другом варианте осуществления изобретение относится к способу лечения состояний, облегчаемых ингибированием ДПП-IV, предусматривающему введение млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения формулы I или его терапевтически приемлемой кислотно-аддитивной соли.

Настоящее изобретение также относится к применению соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли, например, для приготовления лекарственного средства, предназначенного для предупреждения или лечения болезней или состояний, связанных с повышенным уровнем ДПП-IV.

Как отмечено выше, все соединения формулы I и их соответствующие фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли могут применяться для ингибирования ДПП-IV. Способность соединений формулы I и соответствующих их фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей ингибировать ДПП-IV может быть продемонстрирована с помощью анализа с использованием ДПП-IV, продуцируемой клетками линии Сасо-2, позволяющего оценить способность тестируемых соединений ингибировать активность ДПП-IV из экстрактов клеток человеческой карциномы ободочной кишки. Линию клеток Сасо-2 человеческой карциномы ободочной кишки получали из Американской коллекции типовых культур (American Type Culture Collection) (ATCC НТВ 37). Дифференциацию клеток для индукции экспрессии ДПП-IV осуществляют согласно методу, описанному у Reisher и др. в статье, озаглавленной "Increased expression of intestinal cell line Сасо-2", в Proc. Natl. Acad. Sci., том 90, стр.5757-5761 (1993). Клеточный экстракт приготавливают из клеток, солюбилизированных в 10 мМ трис-HCl, 0,15 М NaCl, 0,04 t.i.u. апротинина, 0,5% нонидет-Р40, рН 8,0, и его центрифугируют при 35000xg в течение 30 мин при 4°С для удаления клеточного дебриса. Анализ проводят путем добавления 20 мкг солюбилизированного протеина Сасо-2, разбавленного в конечном объеме 125 мкл буфера для анализа (25 мМ трис-НСl рН 7,4, 140 мМ NaCl, 10 мМ КСl, 1% бычьего сывороточного альбумина), в лунки титрационного микропланшета. После инкубации в течение 60 мин при комнатной температуре реакцию инициировали путем добавления 25 мкл 1 мМ субстрата (Н-аланин-пролин-pNA; pNA обозначает пара-нитроанилин). Реакцию проводят при комнатной температуре в течение 10 мин, после чего для прекращения реакции добавляют 19 мкл 25%-ной ледяной уксусной кислоты. Тестируемые соединения обычно добавляют в виде порций по 30 мкл и объем буфера для анализа уменьшают до 95 мкл. Калибровочную кривую для свободного пара-нитроанилина получают с использованием 0-500 мМ растворов свободного pNA в буфере для анализа. Полученная зависимость является линейной и ее используют для интерполяции поглощения субстрата (каталитическая активность в нмолях разложенного субстрата/мин). Конечную концентрацию определяют путем измерения абсорбции при 405 нм с помощью планшет-ридера для титрационных планшетов типа Molecular Devices UV Max.

Активность тестируемых соединений в качестве ингибиторов ДПП-IV, выраженную в виде IC₅₀, вычисляют на основе зависимости доза-ответ, построенной по 8 точкам с использованием четырехпараметрической логарифмической функции.

Получены следующие значения IC₅₀, приведенные в таблице 1.

Таблица 1
Соединение	Сасо-2 DPP-IV (нМ)
пример 1	3,5±1,5
пример 4	8

Способность соединений формулы I, а также соответствующих их фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей ингибировать ДПП-IV также может быть продемонстрирована путем измерения воздействий тестируемых соединений на активность ДПП-IV в плазме человека и крысы с использованием модифицированной версии метода анализа, описанного Kubota и др. в статье, озаглавленной "Involvement of dipeptidylpeptidase IV in an in vivo immune response" в Clin. Exp. Immunol, том 89, стр.192-197 (1992). В целом анализ состоит в следующем: 5 мкл плазмы добавляют в лунки 96-луночных плоскодонных титрационных микропланшетов (фирма Falcon), после чего добавляют 5 мкл 80 мМ MgCl₂ в буфере для инкубации (25 мМ HEPES, 140 мМ NaCl, 1% БСА с чистотой, пригодной для РИА, рН 7,8). После инкубации в течение 60 мин при комнатной температуре реакцию инициируют путем добавления 10 мкл буфера для инкубации, содержащего 0,1 мМ субстрата (Н-глицин-пролин-АМС; АМС обозначает 7-амино-4-метилкумарин). Планшеты покрывают алюминиевой фольгой (или выдерживают в темноте) и инкубируют при комнатной температуре в течение 20 мин. После проведения реакции в течение 20 мин измеряют флуоресценцию с использованием флуориметра типа CytoFluor 2350 (длина волны возбуждения 380 нм, длина волны испускания 460 нм; положение регулятора чувствительности 4). Тестируемые соединения обычно добавляют в виде порций по 2 мкл и объем буфера для анализа уменьшают до 13 мкл. Зависимость флуоресценции от концентрации свободного АМС получают с использованием 0-50 мМ растворов АМС в буфере для анализа. Полученная зависимость является линейной и ее используют для интерполяции поглощения субстрата (каталитическая активность в нмолях разложенного субстрата/мин). Как и в предыдущем анализе, активность тестируемых соединений в качестве ингибиторов ДПП-IV, выраженную в виде IC₅₀, вычисляют на основе зависимости доза-ответ, построенной по 8 точкам с использованием четырехпараметрической логарифмической функции.

Получены следующие значения IC₅₀, приведенные в таблице 2.

Таблица 2
Соединение	DPP-IV плазмы человека (нМ)	DPP-IV плазмы крысы (нМ)
пример 1	2,7±0,1	2,3±0,1
пример 8	6	12

Принимая во внимание способность соединений формулы I, а также соответствующих их фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей ингибировать ДПП-IV, их можно применять для лечения состояний, облегчаемых ингибированием ДПП-IV. На основе приведенных выше результатов, а также на основе литературных данных следует ожидать, что представленные в настоящем описании соединения могут применяться для лечения таких состояний, как инсулиннезависимый сахарный диабет, артрит, ожирение, осложнений, связанных с трансплантацией аллотрансплантата и чувствительного к действию кальцитонина остеопороза. Кроме того, основываясь на роли глюкагонподобных пептидов (таких как GLP-1 и GLP-2) и их связи с ингибированием ДПП-IV, следует ожидать, что представленные в настоящем описании соединения могут применяться, например, для вызывания седативного или анксиолитического действия, или для уменьшения катаболических изменений после хирургического вмешательства и гормональных реакций на стресс, или для уменьшения смертности и облегчения болезненного состояния после инфаркта миокарда, или для лечения состояний, связанных с указанными выше действиями, которые могут быть опосредованы повышенными уровнями GLP-1 и/или GLP-2.

Более конкретно, соединения формулы I и соответствующие их фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли, например, усиливают немедленный инсулиновый ответ при пероральном введении глюкозы и, следовательно, могут применяться для лечения инсулиннезависимого сахарного диабета. Способность соединений формулы I и соответствующих их фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей усиливать немедленный инсулиновый ответ при пероральном введении глюкозы может быть оценена в опытах на устойчивых к действию инсулина крысах согласно следующему методу.

Самцов крыс линии Sprague-Dawley, которых содержат в течение 2-3 недель на диете с высоким содержанием жира (насыщенный жир = 57% калорий), в день испытаний заставляют голодать приблизительно в течение 2 ч, животных разделяют на группы по 8-10 особей в каждой и вводят перорально дозу 10 мкмолей/кг тестируемого соединения в карбоксиметилцеллюлозе (КМЦ). Через 30 мин после введения тестируемого соединения непосредственно в желудок тестируемых животных вводят пероральным путем болюс, содержащий 1 г/кг глюкозы. Образцы крови, получаемые в различные моменты времени с помощью катетера из яремной вены, подвергают анализу в отношении концентраций глюкозы и иммунореактивного инсулина (ИРИ) и активности ДПП-IV в плазме. Уровни инсулина в плазме анализируют с помощью метода радиоиммунного анализа (РИА), основанного на применении двойного антитела, с использованием специфического антикрысиного антитела к инсулину, полученного от фирмы Linco Research (Сент-Луис, штат Миссури). РИА имеет нижний предел обнаружения 0,5 мкед./мл и разброс в рамках одного анализа и между отдельными анализами менее 5%. Данные выражают в виде % увеличения по отношению к среднему значению для контрольных животных. После перорального введения каждое из тестируемых соединений усиливает немедленный инсулиновый ответ, что приводит к улучшению переносимости глюкозы устойчивыми к действию инсулина тестируемыми животными. Получены следующие результаты, приведенные в таблице 3.

Таблица 3
Соединение	Усиление инсулинового ответа при дозе 10 мкмолей/кг
пример 1	64%

Точная доза соединений формулы I и соответствующих их фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей, которую следует применять для лечения состояний, облегчаемых ингибированием ДПП-IV, зависит от нескольких факторов, включая хозяина (пациента), природу и серьезность состояния, подлежащего лечению, путь введения и конкретное применяемое соединение. Однако в целом состояния, облегчаемые ингибированием ДПП-IV, могут эффективно лечиться, если соединение формулы I или соответствующую его фармацевтически приемлемую кислотно-аддитивную соль вводят энтерально, например перорально, или парентерально, например внутривенно, предпочтительно перорально, в суточной дозе 0,002-5, предпочтительно 0,02-2,5 мг/кг веса тела, или для наиболее крупных приматов в суточной дозе 0,1-250, предпочтительно 1-100 мг. Обычная доза для перорального введения составляет 0,01-0,75 мг/кг, и она может вводиться 1-3 раза в день. Как правило, сначала вводят небольшую дозу, а затем дозу постепенно увеличивают до тех пор, пока не будет определена оптимальная доза для пациента, подлежащего лечению. Верхний предел дозы представляет собой предел, определяемый побочными действиями, и он может быть определен опытным путем для пациента, подлежащего лечению.

Соединения формулы I и соответствующие их фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли могут быть объединены с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями и необязательно с одним или несколькими другими обычными фармацевтическими адъювантами, и они могут вводиться энтерально, например перорально, в форме таблеток, капсул, каплеток и т.д., или парентерально, например внутривенно, в форме стерильных инъецируемых растворов или суспензий. Композиции для энтерального и парэнтерального введения могут быть приготовлены с помощью обычных методов.

Соединения формулы I и соответствующие их фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли могут быть введены в фармацевтические композиции для энтерального и парентерального введения, содержащие количество действующего вещества, эффективное для лечения состояний, облегчаемых ингибированием ДПП-IV, например, в композиции, которые представляют собой стандартную дозируемую форму, и, например, в композиции, которые содержат фармацевтически приемлемый носитель.

Соединения формулы I (включая соединения, описываемые каждым из вариантов формулы, а также соединения, описанные в примерах) могут вводиться в форме чистых энантиомеров (например, ее >98%, предпочтительно >99%) или вместе с R-энантиомером, например, в рацемической форме. Указанные выше диапазоны доз основаны на количестве соединений формулы I (за исключением количества R-энантиомера).

В следующих примерах описаны репрезентативные соединения, подпадающие под объем настоящего изобретения, и способ их синтеза. Однако, должно быть очевидно, что примеры приведены только для цели иллюстрации.

Пример 1

(S)-1-[(3-гидрокси-1-адамантил)амино]ацетил-2-цианпирролидин

А. 1-Аминоадамантан-3-ол:

Может быть использован метод синтеза, описанный в Khim.-Farm. Zh., 20(7), 810-15 (1986), с небольшими модификациями.

К прозрачной и бесцветной охлажденной на льду смеси, содержащей 96%-ную концентрированную серную кислоту (210 мл; 3,943 ммоля) и б5%-ную азотную кислоту (21,0 мл; 217,0 ммолей), при интенсивном перемешивании добавляют небольшими порциями в течение 30 мин 21,0 г (112,0 ммолей) гидрохлорида 1-адамантиламина (99%-ного). После завершения добавления гидрохлорида адамантиламина начинается слабое выделение пузырьков и реакция становится слабо экзотермической. В процессе выделения пузырьков раствор желтого цвета перемешивают при температуре ледяной воды в течение приблизительно 2 ч, а затем при комнатной температуре в течение 30 ч. Затем эту прозрачную реакционную смесь светло-желтого цвета сливают на 100 г льда и образовавшийся раствор становится прозрачным и приобретает сине-зеленую окраску.

Раствор помещают в баню с ледяной водой и перемешивают в течение 30 мин. После этого небольшими порциями в течение 45 мин добавляют приблизительно 550 г КОН (чистота 89%) (8,74 моля). В процессе этого добавления реакция становится экзотермической; температура достигает 80°С и выделяется значительное количество коричневого газообразного NO₂. После окончания добавления реакционная смесь загустевает с образованием белых твердых частиц (представляющих собой как продукт, так и соли). Затем образовавшуюся белую пасту сливают на подушку из целита в воронку Бюхнера и промывают 1,2 л СН₂Сl₂. Затем СН₂Сl₂-слой экстрагируют из водного слоя и сушат над Nа₂SO₄. После этого раствор фильтруют и концентрируют (вакуумный роторный насос), получая 1-аминоадамантан-3-ол в виде твердого вещества белого цвета.

Б. 1-Хлорацетил-2-цианпирролидин

К раствору, содержащему 20,0 г (180,0 ммолей) хлорацетилхлорида и 97 г (0,70 моля) карбоната калия в 150 мл тетрагидрофурана, добавляют по каплям при механическом перемешивании в течение 45 мин раствор, содержащий 20,0 г (180,0 ммолей) L-пролинамида в 500 мл тетрагидрофурана. Затем эту реакционную смесь механически перемешивают еще в течение 2 ч при комнатной температуре. После этого реакционную смесь фильтруют, удаляя соли калия, и фильтрат сушат над Na₂SO₄. Затем Na₂SO₄ удаляют фильтрацией и к этому бесцветному фильтрату добавляют в виде одной порции трифторуксусный ангидрид (25,0 мл, 0,180 моля). После этого реакционную смесь перемешивают с помощью магнитной мешалки в течение 1 ч при комнатной температуре и образовавшийся прозрачный раствор желто-оранжевого цвета концентрируют на роторном испарителе. Избыток трифторуксусного ангидрида удаляют путем добавления этилацетата к концентрированному маслу и повторного концентрирования на роторном испарителе. Эту процедуру очистки повторяют трижды.

Образовавшееся масло распределяют между этилацетатом и водой. Затем продукт экстрагируют этилацетатом и после этого водный слой промывают дважды этилацетатом. Затем объединенные органические слои последовательно промывают водой и соляным раствором, сушат над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют, получая 1-хлорацетил-2-цианпирролидин в виде твердого вещества желтого цвета.

В. (S)-1-[(3-гидрокси-1-адамантил)амино]ацетил-2-цианпирролидин

К гетерогенному раствору указанного в заголовке раздела А соединения (1-аминоадамантан-3-ола) (5,80 г, 34,7 ммоля) в CH₂Cl₂ (68,0 мл) добавляют 9,6 г (69 ммолей) K₂CO₃. Затем эту гетерогенную смесь охлаждают в бане с ледяной водой и в течение 30 мин по каплям добавляют раствор, содержащий 3,0 г (17 ммолей) указанного в заголовке раздела Б соединения (1-хлорацетил-2-цианпирролидина), растворенного в 25,0 мл СН₂Сl₂. Образовавшуюся смесь перемешивают в течение 2 ч при 0°С и в течение 6 дней при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрируют, получая пастообразный продукт желтого цвета, который очищают на силикагеле с помощью системы для экспресс-хроматографии типа SIMS/Biotage Flash, используя в качестве элюента 7%-ный раствор метанола в метиленхлоридe, получая указанное в заголовке соединение в форме свободного основания в виде кристаллического твердого вещества белого цвета (t_пл 138-140°С, ¹³С-ЯМР (част./млн)=119,59).

Примеры 2-12

Приведенные ниже соединения получают аналогично методу, описанному в примере 1 (прежде всего на стадии В), см. таблицу 4.

Все конечные продукты в виде гидрохлоридов получают путем пропускания газообразного НСl через 0,1 молярный раствор свободного основания в тетрагидрофуране до тех пор, пока раствор не становится выраженно кислым, после чего удаляют растворитель (роторный вакуумный насос).

Аминоадамантановые исходные продукты известны из литературы или могут быть получены следующим образом:

Получение 3,5-диметил-1-адамантиламина описано в J. Med. Chem, 25, 1, 51-56, 1982.

Получение 3-этил-1-адамантиламина описано в J. Med. Chem, 25, 1, 51-56, 1982.

3-Метокси-1-адамантиламин может быть получен следующим образом.

К охлажденной с помощью ледяной воды суспензии гидрида калия (0,680 г; 5,95 ммоля) в 15,0 мл тетрагидрофурана при перемешивании добавляют по каплям в течение 30 мин смесь 1-аминоадамантан-3-ола (1,00 г; 5,95 ммоля) и 15,0 мл тетрагидрофурана. Затем образовавшуюся смесь перемешивают еще в течение 30 мин и после этого по каплям в течение 1 мин добавляют йодметан (0,370 мл; 5,95 ммоля). Затем образовавшуюся непрозрачную реакционную смесь белого цвета перемешивают при комнатной температуре в течение 18 ч. После этого смесь разбавляют 50 мл метиленхлорида и фильтруют для удаления неорганических примесей. Затем фильтрат концентрируют и очищают на силикагеле с помощью устройства типа SIMS/Biotage, используя в качестве элюента смесь, содержащую 19% метанола и 1% гидроксида аммония в метиленхлориде, в результате чего получают 3-метокси-1-адамантиламин в виде непрозрачного масла.

Синтез 3-[[(трет-бутиламино)карбонил]окси]-1-аминоадамантана:

К смеси, содержащей 1-аминоадамантан-3-ол (5,00 г; 30,0 ммолей) и карбонат калия (6,20 г; 45 ммолей) в 150 мл тетрагидрофурана, добавляют по каплям в течение 10 мин бензилхлорформиат (4,70 г, 33,0 ммоля). Затем смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч и после этого распределяют между этилацетатом и водой. Затем продукт экстрагируют этилацетатом и водный слой дважды промывают этилацетатом (100 мл). После этого объединенные органические слои последовательно промывают 100 мл 2 н. водного раствора гидроксида натрия, водой и соляным раствором, сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют (роторный вакуумный насос), получая 1-бензилкарбамоиладамантан-3-ол в виде твердого вещества белого цвета с выходом 85%.

К прозрачному раствору, содержащему 1-бензилкарбамоиладамантан-3-ол (1,00 г, 3,32 ммоля) и трет-бутилизоцианат (380 мкл, 3,32 ммоля) в 30 мл метиленхлорида, добавляют с помощью шприца триметилсилилхлорид (20,0 мкл, 0,17 ммоля). Затем эту реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 ч, концентрируют (роторный испаритель) и очищают на силикагеле с помощью устройства типа SIMS/Biotage, используя в качестве элюента 20%-ный этилацетат в гексане, в результате чего получают 3-[[(третбутиламино)карбонил]окси]-1-бензилкарбамоиладамантан в виде твердого вещества белого цвета с количественным выходом.

К смеси, содержащей 3-[[(третбутиламино) карбонил] окси]-1-бензилкарбамоиладамантан (1,50 г, 3,75 ммоля) и 10%-ный палладий на угле (400 мг) в этаноле (150 мл) в сосуде Парра для гидрирования объемом 1 л, добавляют водород (при давлении 50 фунтов/кв.дюйм). Затем эту непрозрачную смесь черного цвета встряхивают в течение 24 ч. После этого реакционную смесь фильтруют через целит для удаления палладиевого катализатора и концентрируют (вакуумный роторный насос), получая 3-[[(трет-бутиламино)карбонил]окси]-1-аминоадамантан в виде прозрачного масла с 99%-ным выходом.

Процесс синтеза 4-[[[(метоксифенил)амино]карбонил]окси]-1-аминоадамантана практически соответствует процессу синтеза 3-[[(трет-бутиламино)карбонил]окси]-1-аминоадамантана за исключением того, что на второй стадии трет-бутилизоцианат заменяют эквивалентным количеством 4-метоксифенилизоцианата, в качестве растворителя используют 1,2-дихлорэтан вместо метиленхлорида и реакционную смесь перемешивают при 50°С в течение 18 ч. Конечный промежуточный амин получают в виде масла.

Процесс синтеза 3-[[(фениламино)карбонил]окси]-1-аминоадамантана практически соответствует процессу синтеза 3-[[(трет-бутиламино)карбонил]окси]-1-аминоадамантана за исключением того, что на второй стадии трет-бутилизоцианат заменяют эквивалентным количеством фенилизоцианата, в качестве растворителя используют 1,2-дихлорэтан вместо метиленхлорида и реакционную смесь перемешивают при 50°С в течение 18 ч. Конечный промежуточный амин получают в виде масла.

Процесс синтеза 2-аминоадамантан-5-ола соответствует процессу синтеза, описанному в примере 1, за исключением того, что в качестве исходного продукта вместо 1-аминоадамантана используют 2-аминоадамантан.

Процесс синтеза нуклеофила 3-ацетокси-1-аминоадамантана практически соответствует процессу синтеза 3-[[(трет-бутиламино)карбонил]окси]-1-аминоадамантана за исключением того, что стандартное ацилирование 1-бензилкарбамоиладамантан-3-ола проводят с использованием 1,2 экв. ацетилхлорида, 3,0 экв. пиридина, 0,1 экв. 4-диметиламинопиридина и 1,2-дихлорэтана, при этом все компоненты перемешивают при комнатной температуре в течение 24 ч. Конечный амин получают в виде густого масла.

Процесс синтеза 3-[[[(диизопропил)амино]карбонил]окси]-1-аминоадамантана практически соответствует процессу синтеза 3-[[(трет-бутиламино)карбонил]окси]-1-аминоадамантана за исключением того, что на второй стадии трет-бутилизоцианат заменяют эквивалентным количеством диизопропилкарбамоилхлорида, в качестве растворителя используют 1,2-дихлорэтан вместо метиленхлорида и реакционную смесь перемешивают при 85°С в течение 18 ч. Конечный промежуточный амин получают в виде твердого вещества серого цвета.

Процесс синтеза 3-[[[(циклогексил)амино]карбонил]окси]-1-аминоадамантана практически соответствует процессу синтеза 3-[[(трет-бутиламино)карбонил]окси]-1-аминоадамантана за исключением того, что на второй стадии трет-бутилизоцианат заменяют эквивалентным количеством циклогексилизоцианата, в качестве растворителя используют 1,2-дихлорэтан вместо метиленхлорида и реакционную смесь перемешивают при 50°С в течение 18 ч. Конечный промежуточный амин получают в виде густого прозрачного масла.

Процесс синтеза 3-этокси-1-адамантиламина (прозрачное масло) соответствует процессу синтеза 3-метокси-1-адамантиламина за исключением того, что вместо йодметана используют йодэтан (1,3 экв.).

Пример композиции:

Таблетки, каждая из которых содержит по 50 мг действующего вещества, например (S)-1-[(3-гидрокси-1-адамантил)амино]ацетил-2-цианпирролидина, могут быть приготовлены следующим образом:

Состав (для 10000 таблеток):

Действующее вещество 500,0 г

Лактоза 500,0 г

Картофельный крахмал 352,0 г

Желатин 8,0 г

Тальк 60,0 г

Стеарат магния 10,0 г

Диоксид кремния (высокодисперсный) 20,0 г

Этанол q.s.

Действующее вещество смешивают с лактозой и 292 г картофельного крахмала и смесь увлажняют спиртовым раствором желатина и гранулируют путем просеивания через сито. После сушки добавляют оставшуюся часть картофельного крахмала, тальк, стеарат магния и высокодисперсный диоксид кремния и смесь прессуют с получением таблеток, каждая из которых имеет массу 145,0 мг и содержит 50,0 мг действующего вещества, при необходимости на таблетки могут быть нанесены насечки для разламывания с целью более точного регулирования дозы.

Формула изобретения

1. N-(Замещенный глицил)-2-цианопирролидины формулы I

где R обозначает адамантил, замещенный в положении 3 и/или в положении 5 одним или двумя заместителями, выбранными из ряда, включающего (С₁-С₁₀)алкил или -OR₁, где R₁ обозначает водород, (С₁-С₁₀)алкил, (С₁-С₈алканоил) или -CO-NR₄R₅, где R₄ и R₅ независимо друг от друга обозначают (С₁-С₁₀)алкил, фенил, который является незамещенным или замещен заместителем, выбранным из ряда, включающего (С₁-С₁₀)алкил и (С₁-С₁₀)алкокси, и где один из радикалов R₄ и R₅ дополнительно обозначает водород или где один из R₄ и R₅ дополнительно обозначает водород, а другой означает циклогексил; и

n равно 0;

в свободной форме или в форме кислотно-аддитивной соли.

2. Соединение по п.1 формулы (IА) или (IВ)

где R’ обозначает гидрокси, С₁-С₇алкокси, C₁-C₈-алканоилокси или R₅R₄N-CO-O-, где R₄ и R₅ независимо друг от друга обозначают С₁-С₇алкил или фенил, который является незамещенным или замещен заместителем, выбранным из ряда, включающего C₁-С₇алкил и С₁-С₇алкокси, и где R₄ дополнительно обозначает водород или где один из R₄ и R₅ дополнительно обозначает водород, а другой обозначает циклогексил, и R’’ обозначает водород; или R’ и R’’ независимо друг от друга обозначают С₁-С₇алкил;

в свободной форме или в форме фармацевтически приемлемой кислотно-аддитивной соли.

3. Соединение формулы I по п.1, выбранное из группы, включающей

(S)-1-[[(3,5-диметил-1-адамантил)амино]-ацетил]-2-цианпирролидин;

(S)-1-[[(3-этил-1-адамантил)амино]ацетил]-2-цианпирролидин;

(S)-1-[[(3-метокси-1-адамантил)амино]ацетил]-2-цианпирролидин;

(S)-1-[[[3-[[(трет-бутиламино)карбонил]окси]-1-адамантил]амино]ацетил]-2-цианпирролидин;

(S)-1-[[[3-[[[(4-метоксифенил)амино]карбонил]окси]-1-адамантил]амино]ацетил]-2-цианпирролидин;

(S)-1-[[[(3-[[(фениламино)карбонил]окси]-1-адамантил]амино]ацетил]-2-цианпирролидин;

(S)-1-[[(5-гидрокси-2-адамантил)амино]-ацетил]-2-цианпирролидин;

(S)-1-[[(3-ацетилокси-1-адамантил)амино]ацетил]-2-цианпирролидин

(S)-1-[[[3-[[[(диизопропил1)амино]карбонил]окси]-1-адамантил]амино]ацетил]-2-цианпирролидин;

(S)-1-[[[3-[[[(циклогексил)амино]карбонил]окси]-1-адамантил]амино]ацетил]-2-цианпирролидин; и

(S)-1-[[(3-этокси-1-адамантил)амино]ацетил]-2-цианпирролидин;

или в каждом случае его фармацевтически приемлемая кислотно-аддитивная соль.

4. Соединение по п.1, представляющее собой (S)-1-[(3-гидрокси-1-адамантил)амино]ацетил-2-цианпирролидин или его фармацевтически приемлемую кислотно-аддитивную соль.

5. Фармацевтическая композиция, предназначенная для лечения состояний, опосредованных ДПП-IV, таких, как инсулиннезависимый сахарный диабет и ожирение, содержащая соединение по п.1 в свободной форме или в форме его фармацевтически приемлемой кислотно-аддитивной соли в сочетании по крайней мере с одним фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем.

ИЗВЕЩЕНИЯ

ND4A - Продление срока действия патента Российской Федерации на изобретение

Дата, до которой продлен срок действия: 15.10.2023

(21) Регистрационный номер заявки: 2001118826

Извещение опубликовано: 27.10.2009БИ: 30/2009